附录A (标准的附录) 实验室诊断方法

A1 镜检 A1.1 粪便常规检查 A1.1.1 粪便性状 急性菌痢粪便量极少，为粘稠的脓血便和粘液便，无粪质；有时为稀便，水样便。 A1.1.2 镜检 A1.1.2.1 加生理盐水1～2滴于洁净玻片上，用牙签选择粪便不正常部分及不同部位，直接涂片。 A1.1.2.2 涂布面积不少于玻片大小的2/3，厚薄均匀。 A1.1.2.3 先用低倍镜观察，然后换高倍镜检查，急性菌痢粪便中，可见大量白细胞(或称脓细胞)，一般平均每高倍镜视野≥15个，并可见红细胞。 A2 病原学诊断方法 A2.1 标本的收集 A2.1.1 患者粪便标本的收集 可采用便盒留便、肛拭或采便管采便。 便盒留便：留取粪便时应采集新鲜粪便的脓血部分、粘液部分、水样便或稀便。便量1～5g。 集体腹泻或食源性暴发患者粪便采集的数额，应根据患者人数的多少，决定采取标本的数量。 A2.1.2 当怀疑患者为菌血症时，应以无菌操作，从静脉血管采取10～15mL血液，放入加有EDTA抗凝剂瓶中送检。 所采取的粪便标本应尽快送检，不得超过2h送到化验室，否则标本应放入Cary－Blair运送培养基中，运送时间超过2h者，应在冰浴条件下送检。 A2.2 分离方法 A2.2.1 用接种环多点沾取标本病变部分，直接划线分离于SS、EMB(或HE、麦康凯)琼脂平板。37℃培养24h。 A2.2.2 血液培养 将采取的抗凝血液标本，放入葡萄糖肉汤，37℃培养，逐日观察结果。一般1～3d内阳性较高。 为提高阳性检出率，可以在标本中加入0.5mL OP乳化剂(聚乙二醇辛基苯基醚)，使血球溶解，以提高阳性检出率。 A2.2.3 挑选可疑菌落 从37℃培养16～24h的分离培养基上，观察挑选可疑菌落，其形态为无色，半透明，圆形，湿润、光滑、突起，大小为1～2mm；挑选可疑菌落，接种TSI和葡萄糖半固体或综合培养基，先划线后穿刺，做好标记，放37℃培养16h以上，观察结果。 A2.2.4 初步生化反应 志贺菌属在TSI上的生化反应为：斜面红色，底层产酸黄色，不产气。在葡萄糖半固体管内产酸为黄色，不产气，无动力。在综合培养基上为：斜面红色中立段产酸黄色，底层绿色，无动力。福氏志贺菌6型在上述三种培养基中，有时可产生少量气体。 A2.3 生化学鉴定 A2.3.1 凡属志贺氏菌属的培养物，应符合表A1所列的生化特性。 表A1 志贺氏菌属系统生化反应

A2.3.2 志贺菌属分为四个生化群。血清学分型与生化反应不一致者，均为非志贺菌。 A2.3.3 生化反应或血清学反应可疑的培养物，均应做革兰氏染色镜检，并加做V.P、苯丙氨酸、西蒙氏柠檬酸盐、赖氨酸和葡萄糖铵试验，与有关的细菌相鉴别。 A3 阿米巴痢疾病原学诊断方法 A3.1 直接涂片法 A3.1.1 取洁净载物玻片一张，在其中央滴生理盐水1～2滴。 A3.1.2 用竹签挑取一小块粪便，在盐水中涂抹成一个直径为1cm粪便薄膜。其厚度以通过粪便薄膜 能看清书报上的字为宜。 A3.1.3 盖上盖玻片后，显微镜下观察(天冷时注意玻片保温)。 A3.2 碘液玻片法涂片制法同A3.1，仅用碘液代替生理盐水而制涂片。包囊呈棕色，未成熟包囊的糖原泡呈棕色，核与囊壁不着色而透明。 A3.3 铁苏木素染色法 A3.3.1 用新鲜粪便于载物玻片上制成薄膜。 A3.3.2 立刻放入热至40℃邵氏固定液中，约3～5min。固定液温度低于40℃时需15～30min。 A3.3.3 再放入70％酒精中5～10min，然后移至70％碘酒精脱汞10min以上，使涂片变为棕色。 A3.3.4 放入70％酒精中1h或过夜，再放入50％酒精中5min。 A3.3.5 用流水轻轻冲洗10min，再用蒸馏水冲洗。 A3.3.6 放入热至40℃20g/L的铁明矾溶液中媒染2min或40g/L的铁明矾溶液中1～6h，自来水冲洗5min。 A3.3.7 移入5g/L的苏木素染色液中1至数小时或过夜，自来水冲洗5min。 A3.3.8 再放入20g/L的铁明矾溶液中20min，至颜色适当，细胞核清晰可见为止，再以流水冲洗5min。 A3.3.9 依次放入50％、70％、80％、90％、95％、100％酒精中各2～10min。 A3.3.10 放入二甲苯和纯酒精各半的溶液中及纯二甲苯中各约2min，以透明之。 A3.3.11 用中性树胶封片、干燥、镜检。 A3.4 染色结果 滋养体的核膜呈深蓝黑色，核仁与核膜之间清晰，核膜内染色质粒分明，细胞质蓝色，食物泡内含物为深蓝色。包囊为蓝色，核与滋养体清晰可见。红细胞呈红色，拟染色体呈深蓝黑色，糖原泡在染色过程中被溶解成空泡。 A3.5 培养检查法 A3.5.1 采取粪便标本，务求新鲜，所用器皿清洁干净。尿液或水勿混入粪便或容器内。 A3.5.2 标本采集，应选择脓血及粘液部分；比较正常的粪便，要采取不同部位。成形或半成形便应采取5～10g，放入便盒。液质或半液质粪便，可用小勺装入试管或标本瓶中。任何容器均应加盖，容器外面切勿沾染粪便。 A3.5.3 粪便采集后，应立即送检，务必在2h内进行检查。 A3.5.4 培养方法(多栖培养法) A3.5.5 成形或半成形便，用灭菌的接种环取豌豆大小，接种于培养基的液体部分，并在管壁上轻轻研磨，使粪便混匀于液内。 A3.5.6 液质或半液质粪便则用灭菌吸管，吸取0.5mL粪液，接种培养基的液体部分中。 A3.5.7 放入37℃温箱，培养48h，用吸管取沉淀物一滴，作涂布检查。方法见A3.1。 A3.5.8 若检查结果为阴性，应从培养管底部吸取沉淀物0.5mL转种另一培养基中，再经48h培养后检查，仍为阴性，报告。 附录B (标准的附录) 预防方法(细菌性和阿米巴性痢疾)

B1 传染源管理 传染源：急性、慢性病人及带菌者。 急性病人应隔离治疗。对炊管人员、饮食品制售人员、水源管理人员、托、幼机构保教人员等重点行业人群中的患者应立即调离原工作岗位，及时访视管理，并给予全程治疗，直至症状消失后，二次便培养阴性方可解除隔离。无便培养条件的情况下，应于症状消失后一周方可解除隔离(托儿患病后处理原则相同)。 慢性痢疾和带菌者应定期进行访视管理，并通过药敏试验选择最敏感的药物给予彻底治疗，待便培养连续三次(每次间隔一周)均为阴性，方可解除访视管理。慢性痢疾和带菌者一律不得从事上述重点行业工作。 暴发疫情中的密切接触者应进行医学观察，在小范围内可投服抗菌药进行预防：氟哌酸0.4gBid连服三天。复方磺胺甲基异恶唑(每片含SMZ0.4g TMP0.08g)成人2片Bid，连服三天。 B2 切断传播途径 传播途径：粪－口途径，可以借食物、水、与病人日常生活接触，及不洁手污染食品、食具、玩具、用具而传播。 应加强包括水源、饮食、环境卫生、消灭苍蝇、蟑螂及其孳生地在内的综合性防治措施，即做好三管一灭(管水、管粪、管饮食、消灭苍蝇)，加强饮用水水源和饮水卫生管理，尤其对地面水在夏季和雨季应做好水的卫生指标监测，水源周围50m以内不得有厕所、猪圈、牲口棚、垃圾堆等污染源的存在，同时做好饮水的消毒工作。切实落实食品卫生措施：生熟分开，病人粪便消毒(漂白粉干粉，则粪药之比为5∶1，应充分混匀)，货款分开、不买、不卖、不食腐烂变质的食品，做好饭前便后洗手，把好病从口入关。 对暴发疫情应立即作出疫情报告，有关卫生防疫部门应迅速赴现场调查、核实，尽快查明暴发原因，并采取果断措施切断传播途径，防治疫情蔓延。 B3 其他 对饮食制售人员、炊管人员、水源管理人员、托幼机构保教人员等重点行业应定期(至少一年一次)进行健康体检及粪便培养，以便尽早发现病例。对新调入的人员在上岗前必须进行健康体检和培训合格后方可上岗。 对重点行业人群应每年进行卫生知识或强化食品卫生知识的培训，坚持持证上岗，严格执行食品卫生法。 医疗单位对每例病例做到早诊断，早报告。对病人做好隔离、消毒知识的宣传，落实各项消毒措施，患者用厕所应做到每日消毒，防止交叉感染。 采取多种形式向广大群众进行卫生防病知识的宣传及健康教育，培养洗手的卫生习惯.提高群众的自我保护意识。

附录C (提示的附录) 菌痢的治疗

C1 一般及对症治疗 C1.1 进易消化饮食，注意水电解质平衡，可给口服补液盐(ORS)，必要时ORS和静脉输液同时应用。 C1.2 高热：物理降温为主，成人也可口服复方阿斯匹林0.5～1.0g，巴米尔(每片含阿斯匹林0.5g)1片。小儿阿斯匹林10mg/(kg·次)或安乃近滴鼻。或1％温盐水1000mL流动灌肠。 C1.3 腹痛：颠茄浸膏片成人8mg Bid或阿托品0.3～0.6mg Bid或4id。 C1.4 腹泻：复方樟脑酊口服成人2～5mL Bid，亦可用易蒙停。 C2 病原治疗 C2.1 喹诺酮类 C2.1.1 吡哌酸：成人0.5g Bid或4id，疗程5～7天。 C2.1.2 诺氟沙星(Norf1oxacin)：成人0.4g Bid或4id，还可用其他喹诺酮类，如氧氟沙星、环丙沙星，但儿童慎用，孕妇忌用。 C2.2 氨基糖甙类：常选用庆大霉素肌注成人，每次8×10(上标始)4(上标终)U，每日2～3次，小儿2～4mg/(kg，日)分2次，必要时静滴。 C2.3 复方磺胺甲基异恶唑(每片含SMZ0.4g，TMP0.08g)：成人2片Bid，小儿50mg/(kg·日)。 C2.4 中毒型菌痢病原治疗常用环丙沙星(Ciprofloracin)：成人200～400mg Bid静滴。 C3 休克型菌痢的处理病原治疗同前。 C3.1 迅速扩充血容量纠正酸中毒：对无明显水电解质失调者成人每日2500～3000mL；小儿轻、中度脱水时总液量120～180mL/(kg·日)，病情好转后可喂水，最好用3：2：1液(葡萄糖：0.9％生理盐水：1/6mol/L乳酸钠或5％碳酸氢钠)或0.9％生理盐水与10％葡萄糖各半。重度脱水时，总液量180～200mL/(kg·日)开始用2：1溶液(0.9％生理盐水和1/6mol/L乳酸钠或5％碳酸氢钠)或0.9％生理盐水20mL于1/2h迅速滴入，剩余的液体用3∶2∶1或1∶1(0.9％生理盐水与5％～10％葡萄糖混合液)，其中半量于10h左右滴入，其余于14h左右滴入，见尿后给钾。 C3.2 改善微循环障碍：抗胆碱类药物山茛菪碱(654－2)成人每次40mg，儿童1～2mg/kg，每10～15min静脉注射1次；危重病例成人可每次50～60mg，儿童3～4mg/kg，直到面色好转、肢体转暖、尿量增多、血压回升，即可减量渐停。 C3.3 维持血压及保护重要器官功能： 维持血压：可用阿拉明0.5～5mg/次静滴，也可10～20mg加在5％葡萄糖液100mL中(滴速和药物浓度视病人血压情况决定)静滴；多巴胺20mg加在5％葡萄糖200mL中静滴。20～40滴/min。 保护重要器官功能：强心剂用毛花强心丙，成人0.2～0.6mg加25％葡萄糖20mL缓慢静滴，必要时4～6h再注0.2～0.4mg，24h内不得超过1mg；小儿按0.02～0.04mg/kg计。 C3.4 肾上腺皮质激素：氢化可的松300～500mg/天静滴，小儿按每日总量5～10mg/kg，分为1～2次静滴；也可用地塞米松成人0.2～0.4mg/kg加小壶静滴，6h可重复1次；小儿每次1～2.5mg，每日1～2次肌注或静滴。 C4 脑型中毒型菌痢的处理 病原治疗同休克型。 C4.1 防治脑水肿：要及时脱水治疗。 20％甘露醇1g/kg快速静注。4～6h1次，两次间隔中间可给50％葡萄糖80～100mL静注。 C4.2 肾上腺皮质激素：短期用2～3d，用法同休克型。 C4.3 呼吸衰竭：山梗菜碱(洛贝林)成人3～10mg/次肌注、3mg/次静注；小儿1～3mg/次肌注、0.3mg/次静注。必要时应用人工呼吸机。 C4.4 惊厥：氯丙嗪或异丙嗪，成人50～100mg/次肌注，小儿1～2mg/(kg·次)，每日2～3次；或巴比土0.2～0.3mg/次肌注、小儿10mg/(kg·次)；安定10～20mg/次肌注或静滴；小儿0.3～0.5mg/(kg·次)肌注或静滴。水合氯醛成人10～20mL/次保留灌肠、小儿0.4mg/(kg·次)，不超过10mL/次保留灌肠。 C4.5 其他如保暖、吸氧等。 C5 小儿液体疗法 C5.1 补充累积损失 轻度脱水应补液量30～50mL/kg； 中度脱水应补液量50～80mL/kg； 重度脱水应补液量80～100mL/kg。 补液溶液的种类： 等渗脱水应用1/2张含钠液； 低渗脱水应用2/3张含钠液； 高渗脱水应用1/3张含钠液。 C5.2 补充继续损失，丢多少补多少，溶液应为1/3张。 C5.3 补充生理需要：不能进食者补液50～80mL/(kg·日)应为1/5张溶液。 C5.4 纠正酸中毒。 C5.5 见尿补钾。

附录D (提示的附录) 阿米巴痢疾的治疗

D1 硝基咪唑类 甲硝唑(灭滴灵)成人0.4～0.8gBid，服5～10天。小儿50mg/(kg·日)分3次。 硝基咪唑类对组织型和肠腔型溶组织阿米巴滋养体均有效，甲硝唑为抗阿米巴治疗的首选药物，毒副作用不大，但有使动物致畸胎作用，故妊娠3个月内忌用。 D2 抗生素 对并发细菌感染时，尤其是暴发型患者除抗阿米巴治疗外，应同时用抗生素(抗生素的应用同细菌性痢疾)。 D3 二氯散糠酸酯 可用于治疗阿米巴原虫携带者。500mg/日三次，共10日。

http://www.sdcdc.cn/yewuzhuanlan/standard/liji.htm